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在使用分光光度計(jì)測(cè)量時(shí)可能產(chǎn)生的誤差來源有哪些

發(fā)布時(shí)間:2018-12-12

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分光光度計(jì)是利用物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收的特性,以較純的單色光作為入射光,測(cè)定物質(zhì)對(duì)光的吸收,從而對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析的儀器。在使用過程中常常會(huì)出現(xiàn)測(cè)量誤差,這些誤差又是如何產(chǎn)生的呢?  

 

1.復(fù)色光對(duì)比耳定律的偏離  

比耳定律成立的前提條件是人射光是單色光,但是精度再高的儀器,即使是雙單色器的分光光度計(jì),也只能獲得近乎單色的光,無法獲得純單色光,它仍然含有狹窄光通帶,具有復(fù)色光的性質(zhì)。而復(fù)色光會(huì)導(dǎo)致比耳定律的正或負(fù)偏離。  

固定狹縫的紫外分光光度計(jì)光譜帶寬一般為1nm或2nm,可調(diào)狹縫的可以做到0.1nm;可見分光光度計(jì)帶寬6nm、snm,甚至十幾納米。  

光譜帶寬應(yīng)該是越小越好,但是,隨著光譜分辨率的提高,儀器的靈敏度降低,所以,選擇儀器時(shí)要綜合考慮各種條件的影響。當(dāng)溶液濃度較小且單色光較純時(shí),可近似認(rèn)為符合比耳定律。  


2.雜散光的影響  

雜散光是指進(jìn)人檢測(cè)器的處于待測(cè)波長(zhǎng)光譜帶寬范圍外的其他波長(zhǎng)組分,它是光譜測(cè)量中誤差的主要來源。產(chǎn)生原因有:  

分光光度計(jì)的色散元件、反射鏡、透鏡及單色器內(nèi)壁灰塵等。在分光光度計(jì)工作波段邊緣波長(zhǎng)處,由于單色器透光率、光源輻射強(qiáng)度、檢測(cè)器靈敏度都較低,雜散光的影響更為顯著。  

雜散光限制儀器的分析上限可引起嚴(yán)重的測(cè)量誤差,實(shí)際工作中,在定量分析時(shí),一般在吸收峰或其附近處測(cè)量樣品吸光度,如果在分析波長(zhǎng)處含有雜散光,這時(shí)樣品的透光率較小,而雜散光大部分透過,使測(cè)量吸光度低于真實(shí)吸光度。  


3.儀器噪聲對(duì)測(cè)t的影響  

儀器噪聲也是儀器的一個(gè)重要指標(biāo),它表征儀器做稀溶液的能力。是疊加在待測(cè)量的分析信號(hào)中的不需要的信號(hào),掃描100%T和0%T線,可觀察到分光光度計(jì)的噪聲水平,如果儀器噪聲較大,會(huì)掩蓋較小的測(cè)量信號(hào),一般用噪音的二倍來表示儀器的靈敏度。  


4.波長(zhǎng)和吸光度準(zhǔn)確度  

樣品的每一個(gè)值都是在一定的波長(zhǎng)下測(cè)得的,如果,波長(zhǎng)誤差很大,測(cè)出的值肯定不準(zhǔn)。吸光度準(zhǔn)確度也是用戶對(duì)儀器的直接要求,更應(yīng)引起足夠的重視。  

國家計(jì)量檢定規(guī)程規(guī)定雙光束紫外可見分光光度計(jì)透射比準(zhǔn)確度為*士0.6%,B級(jí)土1.0%。  

 

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